汞是水體中毒性最強的重金屬元素之一，其測定方法有多種，其中雙硫腙分光光度法是經典且應用廣泛的檢測手段。該方法以雙硫腙為螯合劑，通過與汞離子反應生成有色絡合物，再借助分光光度計進行定量分析。

其測定原理可概括為：在特定條件下，汞離子與雙硫腙形成有色絡合物，該絡合物對特定波長的光產生選擇性吸收，吸光度與汞含量成正比，通過與標準系列比較即可確定樣品中汞的濃度。

一、樣品前處理：消解與轉化

水體中的汞可能以無機汞和有機汞兩種形態存在，分光光度法測定的是總汞含量。因此，樣品須先經過消解處理，將各種形態的汞全部轉化為二價汞離子（Hg2?）。依據國家標準《水質 總汞的測定 高錳酸鉀-過硫酸鉀消解法 雙硫腙分光光度法》（GB/T 7469-1987），消解通常在酸性介質中進行，以高錳酸鉀和過硫酸鉀為氧化劑，在加熱條件下將樣品中的有機汞及其他形態汞完全氧化為Hg2?。此步驟的關鍵在于確保消解徹底，否則有機汞無法與后續顯色劑反應，將導致測定結果偏低。

消解完成后，樣品中仍殘留過量氧化劑，須加入鹽酸羥胺將其還原，以免干擾后續顯色反應。經此處理，樣品中的汞全部以Hg2?形態存在，具備與雙硫腙發生絡合反應的條件。

二、顯色反應：絡合物的形成

顯色是分光光度法測定汞的核心環節。在酸性條件下（通常為0.5 mol/L硫酸介質），Hg2?與雙硫腙（二苯硫代偕肼腙，分子式C??H??N?S）發生螯合反應，生成橙色的二硫腙汞絡合物。雙硫腙分子中含有硫代羰基和偶氮基團，能夠與Hg2?形成穩定的五元環螯合物。該反應具有高度的選擇性——汞與雙硫腙的螯合能力很強，在適當的酸性條件下，多數共存金屬離子不產生干擾。但銅離子是主要干擾物，通常可加入乙二胺四乙酸二鈉（EDTA二鈉）作為掩蔽劑予以消除。

生成的橙色絡合物不溶于水，但易溶于三氯甲烷、四氯化碳等有機溶劑。因此，顯色反應后需采用有機溶劑進行萃取，將絡合物從水相轉移至有機相，同時分離未反應的雙硫腙及其他水溶性雜質。為提高萃取效率和測定靈敏度，部分改良方法采用表面活性劑增溶技術，使絡合物直接在水相中顯色測定，省去萃取步驟。

三、比色測定：吸光度與定量

經萃取分離后，含有橙色絡合物的有機相被轉移至比色皿中，置于分光光度計進行測定。該絡合物在可見光區有特征吸收峰，最大吸收波長通常在485 nm至490 nm之間。不同文獻報道的波長略有差異，這與具體的實驗條件（如溶劑種類、酸度、溫度等）有關。

分光光度法定量的依據是朗伯-比爾定律：當一束單色光通過有色溶液時，溶液的吸光度與有色物質的濃度及光程長度成正比。實際操作中，先配制一系列已知濃度的汞標準溶液，經與樣品相同的顯色和萃取處理后測定吸光度，繪制標準曲線（即工作曲線）。再將樣品測定所得的吸光度代入標準曲線，即可計算出水樣中汞的含量。測定波長處吸光度與汞含量在一定的濃度范圍內呈良好的線性關系。

雙硫腙分光光度法適用于生活污水、工業廢水和受汞污染的地表水的測定。該方法不需要昂貴的儀器設備，操作成本較低，在基層水質化驗室中具有較高的實用價值。然而，該方法也存在一定的局限性：操作步驟較為繁瑣，對實驗條件要求較為嚴格；當水樣中銅、銀等干擾離子含量較高時，需采取掩蔽或分離措施；方法的靈敏度相對原子吸收光譜法、原子熒光光譜法等儀器分析方法偏低。

因此，在痕量汞的測定或大批量樣品的快速篩查中，分光光度法正逐步被更為靈敏、高效的儀器分析方法所替代，但在不具備大型儀器的場合，它仍然是測定水體汞含量的可靠手段。